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Elisa檢測技術(shù)

簡要描述:Elisa檢測技術(shù):酶朕免痞吸附劑測定的其本原理是,目體抗原或抗體結(jié)合到草種百相裁體表面,并保持其免疫活性,②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。

  • 更新時間:2023-10-30
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 訪  問  量:708

詳細(xì)介紹

實驗過程

(1)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:標(biāo)準(zhǔn)品按照說明書稀釋好五個梯度,各個梯度每孔加樣量都為50μL;

(2)加樣:分別設(shè)空白孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40uL,然后再加待測樣品10uL。加樣將樣品加干酶標(biāo)板孔底部,盡最不觸及孔壁,輕輕晃動混勻;

(3)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30min ;

(4)配液洗滌:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜詈30sec后棄去,如此重復(fù)5次,拍干:

(5)加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50uL,空白孔除外;

(6)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30min ;

(7)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30sec后棄去,如此重復(fù)5次,拍干;

(8)顯色:每孔先加入顯色劑A50pL,再加入顯色劑B50uL,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15min;

(9)終止:每孔加終止液50uL,終止反應(yīng);

(10)測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測是各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15min以內(nèi)進行。


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