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大鼠動物髓核細胞的原代培養(yǎng)

簡要描述:大鼠動物髓核細胞的原代培養(yǎng)原代細胞(primary cell):是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞,稱為原代細胞。

  • 更新時間:2024-01-24
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大鼠動物髓核細胞的原代培養(yǎng)方法

頸椎脫臼法處死SD大鼠。

 剃去背毛,75%酒精浸泡5min。

從尾椎處剪開皮膚,取出腰椎。

盡量剔除附著的肌肉,用含2%雙抗的PBS沖洗3-5次。

分離椎節(jié),切開纖維環(huán)分離凝膠狀髓核,將凝膠狀髓核置于PBS中沖洗 次,去除血跡,剪碎髓核組織呈 1mm3大小,移至離心管后加入5倍體積的1.5%Ⅱ型膠原酶,37℃搖床消化2h

消化結(jié)束 ,20%FBS終止消化,100um濾網(wǎng)過濾,1000r/min 離心 5min,棄上清后DMEM/F12 重懸,按 1×105/ml接種于培養(yǎng)板,加入含1%雙抗和 15% FBS 的 DMEM/F12置于37 ℃細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4 d后換液,以后每3天換 液 1 次細胞達 90% 融合后傳。

大鼠動物髓核細胞的原代培養(yǎng)評價

原代細胞(primary cell):是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞,稱為原代細胞。


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